產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
細(xì)胞名稱 乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞；UACC812
形態(tài)特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞是由LiebovitzA等于1986年從一名43歲的白人女性乳腺導(dǎo)管癌患者的乳腺切除腫瘤組織中分離建立的；手術(shù)前該病人曾接受過廣泛的。該細(xì)胞HER-2/neu癌基因序列有15倍的擴(kuò)增；雌激素受體ER、孕激素受體PR和糖蛋白P陰性。
培養(yǎng)條件: L15:LeibovitzMedium10%FBS
傳代方法: 1:3傳代；5~7天1次。
傳代情況: 不詳
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法（-）
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產(chǎn)品名稱 | 乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞；UACC812 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63291 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，超低比價，產(chǎn)品名稱貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
甘膽酸鈉 ;甘氨膽酸鈉Phospho-HER4/ErbB4 (Tyr984) Antibody3,5-二甲基金剛鹽酸鹽
甘露；D-甘露糖ALK (31F12) Mouse mAb2-氧代-丁基酸二甲酯
D-半鹽酸鹽一水CIITA Antibody叔戊氧基
鈣蛋白酶抑制劑II(進(jìn)口)SKAR α/β Antibody三唑鈉
炔孕酮/素(標(biāo)準(zhǔn)品)Frizzled5 Antibody甲氨基-甲酸
炔孕酮/素α-Amylase (D55H10) XP® Rabbit mAb異基甲
D-α-Amylase (D55H10) XP® Rabbit mAb6-溴-3,二氫-1H-2-萘酮
DL-VIP (D8J1V) Rabbit mAb (IHC Formulad)2,4,6-*酰
DL-Mouse (E1D5H) mAb IgG3 Isotype Control鄰羥基對*
L-蛋氨酸;ERp44 (D17A6) XP® Rabbit mAb5-酸吡哆
DL-氨酸ERp44 (D17A6) XP® Rabbit mAb溴-2-氟聯(lián)
DL-天冬酰，一水MMP-7 (D4H5) XP® Rabbit mAb5,6-二
DL-氨酸MMP-7 (D4H5) XP® Rabbit mAb1-甲基-咪唑甲酸
DL-PPIG Antibody2-溴-5-甲基噻唑
DL-;蛋氨酸Phospho-PPIG (Ser376) Antibody溴甲酯
DL-天冬氨酸Phospho-Rictor (Thr1135) (D30A3) Rabbit mAb溴-2-氟-5-
DL-谷氨酰Phospho-Rictor (Thr1135) (D30A3) Rabbit mAb3,5-二甲基-羥基甲
DL-IRAP Antibody2-哌啶甲酸甲酯
DL-氨酸甲酯鹽酸鹽FastScan™ Phospho-Vimentin (Ser56) ELISA Kit環(huán)硫烷
L-5酯Enolase-1 Antibody2--
N-酰-DL-Enolase-1 Antibody酸
N-碳芐氧基賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸PI3 Kinase Class III Antibody
(標(biāo)準(zhǔn)品)LSP1 Antibody基*基三
Plexin A1 Antibody羥基-6-甲基-2-吡啶甲
H-Met-OtBu.HCLVISTA (D5L5T) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)5--2-吡啶
麥芽糖Bak Antibody2-氨基-基吡啶
L-酰AsCpf1 (Strain <i>BV3L6</i>) Antibody醋酸銠
L-甲酯鹽酸鹽Phospho-HDAC3 (Ser424) Antibody1H,1H-五氟
N-酰-L-酯DNA-PKcs (E6U3A) Rabbit mAb2-(溴甲基)酸甲酯
N-酰-DL-Plexin A4 (C5D1) Rabbit mAb6-溴己酸
N-甲酰-DL-Phospho-VEGF Receptor 2 (Tyr1059) (D5A6) Rabbit mAb五氟水合物, CH
L-叔丁酯GFAT1 Antibody五氟酸
O-芐基-L-SATB2 (E4N4A) Rabbit mAbN-(基基)
O-芐基-L-芐酯鹽酸鹽CD44 (IM7) Rat mAb (PerCP-Cy5.5® Conjuga)1-基-羥基-1,2,三唑
O-芐基-L-甲酯鹽酸鹽PDHK1 (C47H1) Rabbit mAbN-芐基咪唑
L-正叔丁酯鹽酸鹽PDHK1 (C47H1) Rabbit mAb(R)-1,2-
瘤細(xì)胞；BT-325形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-S100B Monoclonal Antibody
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞；3T3-L1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-RIPK3 Polyclonal Antibody
小鼠肺細(xì)胞；MML1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-KRT17 Monoclonal Antibody
黃胸鼠肺成纖維細(xì)胞；YCR形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-METTL3 Polyclonal Antibody
灰松鼠皮膚細(xì)胞；GSQS1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-SIRT1 Polyclonal Antibody
小鼠結(jié)締組織L細(xì)胞株929克隆；L-929[L929]形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-CAMK4 Polyclonal Antibody
小鼠骨髓瘤細(xì)胞；Sp2/0-Ag14形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣；圓形生長特性: 懸浮生長Anti-IKBA Polyclonal Antibody
乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞；UACC812大鼠(Cortisol)ELISA試劑盒CGELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒CGELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠骨鈣素/骨谷氨蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒cGMPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒cGMPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠遲現(xiàn)抗原(VLA)ELISA試劑盒cGMPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISA試劑盒CGRPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒CGRPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
大鼠雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒CGRPELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
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