公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
小鼠肺成纖維細(xì)胞；WML2 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63752 |
細(xì)胞名稱 小鼠肺成纖維細(xì)胞；WML2
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性小鼠的肺組織。1985年中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS
傳代方法: 1：2傳代；3-4天一次
傳代情況: P6
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法（-）
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Tricin 7-O-glucoside
CAS No.：32769-01-0
中文名：苜蓿素-7-O-葡萄糖苷
分子式：C23H24O12
三七皂苷R1 訂購(gòu)|咨詢 跨膜蛋白27(TMEM27) 規(guī)格： 20mg
圣草次苷 訂購(gòu)|咨詢 跨膜蛋白27(TMEM27) 規(guī)格： 20mg
1羥基2,3,4,7四氧基山山 訂購(gòu)|咨詢 跨膜蛋白27(TMEM27) 規(guī)格： 10mg
熊去氧膽 訂購(gòu)|咨詢 跨膜蛋白2樣蛋白(TMEM2L) 規(guī)格： 20mg
新芒果苷 訂購(gòu)|咨詢 跨膜蛋白5(TMEM5) 規(guī)格： 20mg
鄰氧基桂 訂購(gòu)|咨詢 蝸管蛋白(COIL) 規(guī)格： 20mg
基蓮心 訂購(gòu)|咨詢 嗅素1(OLFM1) 規(guī)格： 20mg
葒草苷 訂購(gòu)|咨詢 嗅素2(OLFM2) 規(guī)格： 20mg
厚樸 訂購(gòu)|咨詢 嗅素3(OLFM3) 規(guī)格： 20mg
異佛手柑內(nèi)酯 訂購(gòu)|咨詢 嗅素4(OLFM4) 規(guī)格： 20mg
隱綠原 訂購(gòu)|咨詢 嗅素4(OLFM4) 規(guī)格： 20mg
豆甾(95%) 訂購(gòu)|咨詢 嗅素4(OLFM4) 規(guī)格： 20mg
香葉木素 訂購(gòu)|咨詢 嗅蛋白(Olfactorin) 規(guī)格： 20mg
華基（97%） 訂購(gòu)|咨詢 錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1) 規(guī)格： 20mg
長(zhǎng)春瑞濱 訂購(gòu)|咨詢 錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1) 規(guī)格： 20mg
蒼術(shù)素 訂購(gòu)|咨詢 錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1) 規(guī)格： 20mg
白花前胡素 訂購(gòu)|咨詢 錫蛋白(SNN) 規(guī)格： 20mg
補(bǔ)骨脂二氫黃 訂購(gòu)|咨詢 催產(chǎn)素(OT) 規(guī)格： 20mg
WAPL EBV核蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium phosphate, dibasic, heptahydrate
CAPD3/hCAPD3 濃縮素2復(fù)合亞基D3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml dATP 100 mM solution
AMSH 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium decanoate
ASB3 錨蛋白重復(fù)序列細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Agarose
EIF2C1/Ago1 真核翻譯起始因子2C1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Agarose
Anillin 胞環(huán)蛋白肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Phytohemagglutinin
BIN3 細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Kinetin,6Furfurylaminopurine
CCDC11 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml EGTA, egtazic acid
紅相關(guān)物質(zhì)N標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱：
吡嗪酰標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Pyrazinamide
()表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱：
煙酰標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Niacinamide (Vitamin B3)
異標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1.2ml×3ampules 英文名稱：Cumene
曲三硅相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱：
醋標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱：Betamethasone Acetate
阿散標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱：Arsanilic Acid
琥珀美爾標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Metoprolol Succinate
非那雄標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱：Finasteride
小鼠肺成纖維細(xì)胞；WML2棉子糖-雙岐桿菌鑒定規(guī)格：20支詳情介紹
牛津瓊脂（OXA）平板（9cm）規(guī)格：10個(gè)/包用途：用于單增李氏菌的選擇性分離
無(wú)氮培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于自生固氮菌和鉀細(xì)菌的培養(yǎng)
輔酶I（NDA）規(guī)格：1g用途：進(jìn)口
匹克氏肉湯基礎(chǔ)A規(guī)格：100g用途：用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng) ，需添加脫纖維羊血（GB標(biāo)準(zhǔn)）
SIM動(dòng)力培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于動(dòng)力試驗(yàn)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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